Enzymkinetik: Theorie und Methoden, 3. Auflage by Prof. Dr. Hans Bisswanger(auth.)

By Prof. Dr. Hans Bisswanger(auth.)

Content:
Chapter 1 a number of Gleichgewichte (pages 5–52):
Chapter 2 Enzymkinetik (pages 53–168):
Chapter three Methoden (pages 169–259):

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Trotzdem wäre der Schluß nicht korrekt, die beiden Kurvenenden repräsentierten die getrennten Bindungsklassen und aus Tangenten an diese ließen sich die Konstanten direkt ermitteln, wie sich aus Abb. 6 B–D erkennen läßt. Näherungsweise kann man beim ScatchardDiagramm (Abb. 6 C) diese Tangenten derart parallel verschieben, daß die Summe ihrer Ordinatenschnittpunkte dem Ordinatenschnittpunkt der experimentellen Kurve entspricht. Nach einem graphischen Verfahren nach Rosenthal (1967) erhält man die resultierende Bindungskurve aus zwei solcher Geraden mit Hilfe von Ursprungsgeraden.

Als gleichberechtigte Partner werden Makromoleküle und Ligand in vergleichbarer Menge eingesetzt. Die Gesamtmenge des Liganden wird durch den Anteil des gebundenen spürbar reduziert, [A]0 ist nicht mehr mit [A] gleichzusetzen. Dies bedingt, daß die aus optischen Titrationen erhaltenen Sättigungsfunktionen nicht mehr dem durch Gl. 23) beschriebenen hyperbolen Verlauf folgen (Abb. 3A) und daher auch nicht nach den bisher besprochenen Verfahren ausgewertet werden können. Weiter wird der Anteil an [A]geb nur als ein dem Sättigungsgrad des Makromoleküls proportionales optisches Meßsignal und nicht in molaren Einheiten erhalten.

1 formuliert. 44) die Summierung aller Einzelschritte, wobei die Zwischenformen EA bis EAn–1 eliminiert und daher als nicht vorhanden angesehen werden. Um einem solchen Mechanismus zu genügen, müßten alle Ligandenmoleküle gleichzeitig an das Makromolekül binden und dieses in einem einzigen Schritt völlig absättigen. Teilgesättigte Formen dürften nicht auftreten. Ein solcher Mechanismus ist schwer vorstellbar, da sich die Liganden nicht gegenseitig absprechen können und ein einzelnes Ligandenmolekül nicht daran gehindert werden kann, alleine eine freie Bindungsstelle zu besetzen.

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